قدرت تفکیک میکروسکوپ چقدر است؟ بهتر است یکبار ببینید یا میکروسکوپ با وضوح فوق العاده بالا. همه چیز درباره بزرگنمایی میکروسکوپ

النا 3013

این مقاله در مورد بزرگنمایی یک میکروسکوپ، واحدهای اندازه گیری یک مقدار معین، روش هایی برای تعیین بصری قدرت تفکیک یک ابزار بحث خواهد کرد. همچنین در مورد پارامترهای استاندارد این مقدار و نحوه محاسبه افزایش برای نوع خاصی از کار صحبت خواهیم کرد.

اغلب، پارامترهای اصلی قدرت یک میکروسکوپ روی بشکه لنز نشان داده می شود. پیچ لنز را باز کنید و آن را بررسی کنید. می توانید دو عدد را ببینید که به صورت کسری نوشته شده اند. اولی بزرگنمایی است، دومی دیافراگم عددی است.

دیافراگم توانایی دستگاه برای جمع آوری نور و گرفتن تصویر واضح را مشخص می کند. همچنین روی لنز می توان طول لوله و ضخامت روکش مورد نیاز برای کار را نشان داد.

همه چیز درباره بزرگنمایی میکروسکوپ

بزرگنمایی در مضرب (x) اندازه گیری می شود. رابطه سیستم چشمی-هدف کاملاً اهمیت آن را تعیین می کند. حاصل بزرگنمایی چشمی و شیئی به ما می گوید بزرگنمایی کاری که این میکروسکوپ ایجاد می کند. وابستگی کل بزرگنمایی به بزرگنمایی لنز آشکار است. لنزهای برقی به گروه های زیر تقسیم می شوند:

کوچک (بیش از 10 برابر)؛

متوسط ​​(تا 50 برابر)؛

بزرگ (بیش از 50 برابر)؛

بسیار بزرگ (بیش از 100 برابر).

حداکثر بزرگنمایی هدف برای میکروسکوپ نوری 2000x است. مقدار چشمی معمولاً 10 برابر است و به ندرت تغییر می کند. اما بزرگنمایی لنز بسیار متفاوت است (از 4 تا 100x و 2000x).

هنگام انتخاب یک میکروسکوپ، باید در نظر بگیرید که چه کسی روی آن کار می کند و حداکثر بزرگنمایی ممکن است مورد نیاز باشد. به عنوان مثال، 200 برابر برای یک کودک پیش دبستانی کافی است، میکروسکوپ مدرسه و دانشگاه دارای بزرگنمایی 400-1000 برابر است. اما دستگاه تحقیق باید حداقل 1500-2000x بدهد. این مقدار به شما امکان می دهد با باکتری ها و ساختارهای سلولی کوچک کار کنید.

قیمت در فروشگاه های اینترنتی:

Oksar.ru-مسکو 900 R


پیشنهادات بیشتر

وضوح ابزار

چه چیزی وضوح و کیفیت تصویری را که میکروسکوپ می دهد تعیین می کند؟ این متاثر از وضوح دستگاه است. برای محاسبه این مقدار، باید ضریب طول موج نور و دو دیافراگم عددی را پیدا کنید. بنابراین، توسط کندانسور و هدف میکروسکوپ تعیین می شود. به عنوان یادآوری، مقدار عددی دیافراگم را می توان روی بشکه لنز مشاهده کرد. هرچه بالاتر باشد، وضوح دستگاه بهتر است.

یک میکروسکوپ نوری دارای حد تفکیک 0.2 میکرون است. این حداقل فاصله تا تصویر زمانی است که تمام نقاط جسم قابل تشخیص باشند.

بزرگنمایی مفید میکروسکوپ

صحبت از بزرگنمایی مفید زمانی است که چشم محقق به طور کامل از قدرت تفکیک میکروسکوپ استفاده کند. این امر با مشاهده جسم در حداکثر زاویه مجاز به دست می آید. بزرگنمایی مفید فقط به دیافراگم عددی و نوع لنز بستگی دارد. هنگامی که محاسبه می شود، دیافراگم عددی 500-1000 برابر افزایش می یابد.

یک لنز خشک (فقط هوا بین جسم و عدسی) بزرگنمایی مفید 1000x ایجاد می کند، یعنی. دیافراگم عددی 1 است.

یک لنز غوطه‌وری (لایه‌ای از محیط غوطه‌وری بین جسم و لنز) بزرگنمایی مفیدی معادل 1250 برابر ایجاد می‌کند، یعنی. دیافراگم عددی 1.25 است.

یک تصویر تار یا مبهم نشان می دهد که بزرگنمایی مفید بیشتر یا کمتر از مقادیر بالا است. افزایش یا کاهش مقدار تنظیم شده به طور قابل توجهی عملکرد میکروسکوپ را مختل می کند.

در این مقاله در مورد ویژگی های اصلی میکروسکوپ نوری و روش های محاسبه آنها صحبت کردیم. امیدواریم این اطلاعات هنگام کار با این دستگاه پیچیده مفید باشد.

به دوستان بگویید

بزرگ شدن سیستم- یک عامل مهم، که بر اساس انتخاب یک یا میکروسکوپ دیگر، بسته به حل وظایف ضروری است. همه ما به این واقعیت عادت کرده ایم که کنترل عناصر نیمه هادی روی یک میکروسکوپ بازرسی با بزرگنمایی 1000 برابر یا بیشتر ضروری است، حشرات را می توان با کار با میکروسکوپ 50 برابری مطالعه کرد، و فلس های پیاز را که با ید یا رنگ آمیزی شده بودند مطالعه کردیم. سبز درخشان در مدرسه روی میکروسکوپ تک چشمی، زمانی که مفهوم بزرگنمایی هنوز برای ما آشنا نبود.

اما وقتی یک میکروسکوپ دیجیتال یا کانفوکال در مقابل خود داریم و مقادیر 2000x، 5000x روی اهداف قرار دارند، چگونه مفهوم بزرگنمایی را تفسیر کنیم؟ این به چه معناست، آیا بزرگنمایی 1000 برابری در یک میکروسکوپ نوری تصویری مشابه میکروسکوپ دیجیتال 1000 برابری ایجاد می کند؟ در این مقاله با این موضوع آشنا خواهید شد.

سیستم زوم اپتیکال

هنگامی که ما با میکروسکوپ آزمایشگاهی یا استریوسکوپی کار می کنیم، محاسبه بزرگنمایی فعلی سیستم دشوار نیست. لازم است که بزرگنمایی تمام اجزای نوری سیستم چند برابر شود. معمولاً در مورد میکروسکوپ استریو، این یک درام و چشمی شیئی، زوم یا بزرگنمایی است.
در مورد یک میکروسکوپ آزمایشگاهی معمولی، وضعیت حتی ساده‌تر است - بزرگ‌نمایی کل سیستم = بزرگ‌نمایی چشمی‌ها در بزرگ‌نمایی عدسی نصب‌شده در موقعیت کار. یادآوری این نکته مهم است که گاهی اوقات مدل‌های خاصی از لوله‌های میکروسکوپ وجود دارد که دارای ضریب افزایش یا کاهش هستند (به‌ویژه برای مدل‌های قدیمی‌تر میکروسکوپ‌های لایتز رایج است). همچنین، اجزای نوری اضافی، چه یک منبع روشنایی کواکسیال در میکروسکوپ استریو یا یک آداپتور میانی دوربین واقع در زیر لوله، ممکن است یک ضریب بزرگنمایی اضافی داشته باشند.


اجزای نوری اضافی گاهی اوقات ضریب بزرگنمایی خود را به غیر از 1 دارند. در این مورد، روشنگر کواکسیال (مورد 2) میکروسکوپ استریوی Olympus SZX16 دارای ضریب بزرگنمایی اضافی 1.5 برابر است.

به عنوان مثال، یک میکروسکوپ استریو با چشمی 10 برابر، شیئی 2 برابر، زوم 8 برابر و واحد روشنایی کواکسیال با ضریب 1.5 برابر، بزرگنمایی نوری کلی 10x2x8x1.5 = 240x خواهد داشت.


نمودار شماتیک ثبت تصویر در میکروسکوپ نوری. چشمی تصویر ساخته شده توسط لنز را بزرگ کرده و یک تصویر مجازی را تشکیل می دهد.

در این حالت، بزرگنمایی نوری (G) باید به عنوان نسبت مماس زاویه شیب پرتوی که از سیستم نوری به فضای تصویر بیرون آمده است به مماس زاویه پرتو مزدوج با آن در فضای تصویر درک شود. فضای اشیاء یا نسبت طول قطعه تشکیل شده توسط سیستم نوری تصویر، عمود بر محور سیستم نوری، به طول خود قطعه

افزایش هندسی سیستم

در مواردی که سیستم چشمی ندارد و تصویر بزرگ شده توسط دوربین روی صفحه نمایشگر تشکیل می شود، به عنوان مثال، مانند میکروسکوپ، باید به اصطلاح بزرگنمایی هندسی سیستم نوری ادامه داد.
بزرگنمایی هندسی میکروسکوپ نسبت اندازه خطی تصویر جسم روی مانیتور به اندازه واقعی جسم مورد مطالعه است.
می توانید مقدار بزرگنمایی هندسی را با ضرب مقادیر زیر بدست آورید: زوم اپتیکال لنز، زوم اپتیکال آداپتور دوربین، نسبت مورب مانیتور به قطر ماتریس دوربین.
به عنوان مثال، هنگام کار بر روی یک میکروسکوپ آزمایشگاهی با شیئی 50x، آداپتور دوربین 0.5x، دوربین 1/2.5 اینچی و نمایش تصویر بر روی یک مانیتور لپ تاپ 14 اینچی، بزرگنمایی هندسی سیستم = 50x0.5x را دریافت خواهیم کرد. (14/0.4) = 875x.
اگرچه بزرگنمایی نوری در این حالت در مورد چشمی های 10 برابر برابر با 500 برابر خواهد بود.

میکروسکوپ های دیجیتال، پروفیلومترهای هم کانونی، میکروسکوپ های الکترونی و سایر سیستم هایی که تصویر دیجیتالی از یک شی را بر روی صفحه نمایشگر تشکیل می دهند با مفهوم بزرگنمایی هندسی عمل می کنند. این مفهوم را با زوم اپتیکال اشتباه نگیرید.

وضوح میکروسکوپ

یک تصور غلط گسترده وجود دارد که وضوح یک میکروسکوپ و بزرگنمایی آن توسط یک رابطه صلب به هم مرتبط هستند - هر چه بزرگنمایی بیشتر باشد، اجسام کوچکتری را می توانیم در آن ببینیم. این درست نیست. توسط بیشتر یک عامل مهمهمیشه باقی می ماند اجازهسیستم نوری به هر حال، افزایش یک تصویر حل نشده اطلاعات جدیدی در مورد آن به ما نمی دهد.

وضوح یک میکروسکوپ به مقدار عددی دیافراگم شیئی و همچنین به طول موج منبع نور بستگی دارد. همانطور که می بینید، هیچ پارامتر افزایش سیستم در این فرمول وجود ندارد.

که در آن λ میانگین طول موج منبع نور، NA دیافراگم عددی هدف، R وضوح سیستم نوری است.

هنگام استفاده از شیئی با NA 0.95 در میکروسکوپ آزمایشگاهی با منبع هالوژن (متوسط ​​طول موج حدود 500 نانومتر)، وضوحی در حدود 300 نانومتر بدست می آوریم.

همانطور که از مدارمیکروسکوپ نوری، چشمی ها تصویر واقعی جسم را بزرگ می کنند. اگر مثلاً بزرگنمایی چشمی ها را 2 برابر افزایش دهیم (عدد چشمی را 20 برابر در میکروسکوپ قرار دهیم)، بزرگنمایی کل سیستم دو برابر می شود، اما وضوح تصویر ثابت می ماند.

یادداشت مهم

فرض کنید برای ساخت یک میکروسکوپ آزمایشگاهی ساده دو گزینه داریم. اولین مورد با استفاده از یک هدف 40x NA 0.65 و چشمی 10x ساخته شده است. دومی از یک شیئ 20x NA 0.4 با چشمی 20x استفاده می کند.

بزرگنمایی میکروسکوپ ها در هر دو نسخه یکسان خواهد بود= 400x (ضرب ساده بزرگنمایی عینی و چشمی). و اینجا وضوح در گزینه اول بالاتر خواهد بود،نسبت به دومی، زیرا دیافراگم عددی شی 40x بزرگتر است. علاوه بر این، میدان دید چشمی را فراموش نکنید، در 20 برابر این پارامتر 20-25٪ کمتر است.

قدرت تفکیک یک میکروسکوپ با متقابل حد تفکیک خطی مشخص می شود. بر اساس تئوری پراش آبه، حد خطی تفکیک میکروسکوپ، یعنی حداقل فاصله بین نقاط یک جسم که به صورت مجزا به تصویر کشیده می شوند، با فرمول تعیین می شود.

حد وضوح خطی کجاست. طول موج نوری که در آن مشاهده انجام می شود. A دیافراگم عددی یا به سادگی دیافراگم یک میکروسکوپ (ریزابژه) است.

از فرمول (324) چنین بر می آید که برای افزایش وضوح میکروسکوپ، باید طول موج نور را کاهش داد و دیافراگم عددی میکروسکوپ را افزایش داد. اولین امکان با عکاسی از اجسام مورد مطالعه در پرتو فرابنفش محقق می شود.

دیافراگم میکروسکوپ با فرمول تعیین می شود

یکی دیگر از امکان افزایش دیافراگم، استفاده از مایع غوطه وری است که بین شی مورد نظر و میکروابژه قرار می گیرد. به عنوان یک مایع، آب، روغن سدر، مونوبرومونافتالین استفاده می شود.

برای اینکه چشم ناظر به طور کامل از وضوح میکروسکوپ تعیین شده با فرمول (324) استفاده کند، لازم است بزرگنمایی ظاهری مناسبی داشته باشد. اگر دو نقطه از صفحه کانونی جلوی سیستم نوری در یک فاصله خطی از یکدیگر قرار داشته باشند (شکل 157)، سپس

برنج. 157. طرحی برای تعیین بزرگنمایی مفید میکروسکوپ

فاصله زاویه ای بین این نقاط در فضای تصویر

اگر فاصله زاویه ای بین آنها کمتر از حد زاویه ای قدرت تفکیک چشم نباشد، چشم ناظر این نقاط را جدا از هم درک می کند.

از فرمول های (325)، (324) و (317) چنین بر می آید که بزرگنمایی ظاهری میکروسکوپ

با توجه به آخرین فرمول، می توان حداقل بزرگنمایی ظاهری را تعیین کرد که در آن چشم ناظر به طور کامل از وضوح میکروسکوپ استفاده می کند. این افزایش مفید نامیده می شود. هنگام استفاده از فرمول (326) باید در نظر داشت که در بسیاری از موارد قطر مردمک خروجی میکروسکوپ است که منجر به افزایش حد تفکیک زاویه ای چشم می شود تا بزرگنمایی میکروسکوپ را بدست آوریم.

افزایش دادنبزرگنمایی میکروسکوپ به عنوان حاصلضرب بزرگنمایی هدف و بزرگنمایی چشمی تعریف می شود. میکروسکوپ های تحقیقاتی معمولی دارای بزرگنمایی چشمی 10 و بزرگنمایی های عینی 10، 45 و 100 هستند. بر این اساس، بزرگنمایی چنین میکروسکوپی از 100 تا 1000 است. برخی از میکروسکوپ ها دارای بزرگنمایی تا 2000 هستند. منطقی نیست، زیرا وضوح بهبود نمی یابد. برعکس، کیفیت تصویر بدتر می شود.

فرمول بزرگنمایی میکروسکوپ

کیفیت تصویر مشخص می شود وضوح میکروسکوپ، یعنی حداقل فاصله ای که در آن اپتیک یک میکروسکوپ می تواند دو نقطه با فاصله نزدیک را به طور جداگانه تشخیص دهد. وضوح به دیافراگم عددی شی، کندانسور و طول موج نوری که آماده سازی را روشن می کند بستگی دارد. دیافراگم عددی (باز شدن) به دیافراگم زاویه ای و ضریب شکست محیطی که بین عدسی جلوی شی و کندانسور و آماده سازی قرار دارد بستگی دارد.

علاوه بر وضوح سیستم، دیافراگم عددی نسبت دیافراگم لنز را مشخص می کند: شدت نور در واحد سطح تصویر تقریباً برابر با مربع NA است. مقدار NA برای یک لنز خوب حدود 0.95 است. میکروسکوپ معمولاً طوری طراحی می شود که بزرگنمایی کل آن حدود 1000 NA باشد.

محدودیت وضوح- کوچکترین فاصله بین دو نقطه با فاصله نزدیک از یک جسم که در زیر میکروسکوپ قابل مشاهده است (به عنوان دو نقطه درک می شود).

دیافراگم (lat. apertura - سوراخ) در اپتیک - مشخصه یک دستگاه نوری است که توانایی آن در جمع آوری نور و مقاومت در برابر تاری پراش جزئیات تصویر را توصیف می کند. بسته به نوع سیستم نوری، این مشخصه می تواند بعد خطی یا زاویه ای باشد. به عنوان یک قاعده، در میان جزئیات یک ابزار نوری، به اصطلاح دیافراگم دیافراگم به طور خاص متمایز می شود، که به شدت قطر پرتوهای نوری را که از ابزار نوری عبور می کنند، محدود می کند. اغلب، نقش چنین دیافراگم دیافراگمی توسط قاب یا، به سادگی، لبه های یکی از عناصر نوری (عدسی، آینه، منشور) انجام می شود.

دیافراگم زاویه ای -زاویه بین پرتوهای شدید پرتو نور مخروطی در ورودی (خروجی) سیستم نوری.

روزنە عددی -برابر است با حاصل ضرب ضریب شکست محیط بین جسم و عدسی و سینوس زاویه دیافراگم. این مقدار است که به طور کامل همزمان نسبت دیافراگم، قدرت تفکیک شی میکروسکوپ را تعیین می کند. برای افزایش دیافراگم عددی اشیاء در میکروسکوپ، فضای بین شی و لپه با یک مایع غوطه ور پر می شود.

گوشهدیافراگم شیئی حداکثر زاویه (AOB) است که در آن پرتوهایی که از نمونه عبور کرده اند می توانند وارد شیء شوند. روزنە عددیعدسی برابر است با حاصلضرب سینوس نصف دیافراگم زاویه ای و ضریب شکست محیطی که بین لام شیشه ای و عدسی جلوی شیء قرار دارد. N.A. = n sinα که در آن، N.A. - روزنە عددی؛ n ضریب شکست محیط بین آماده سازی و هدف است. sinα - سینوس زاویه α برابر با نیمی از زاویه AOB در نمودار.

بنابراین، دیافراگم سیستم‌های خشک (بین عدسی جلوی هدف و هوای آماده‌سازی) نمی‌تواند بیشتر از 1 باشد (معمولاً بیش از 0.95). محیطی که بین آماده سازی و هدف قرار می گیرد، مایع غوطه وری یا غوطه وری نامیده می شود و عدسی که برای کار با مایع غوطه ور طراحی شده است، غوطه وری نامیده می شود. با تشکر از غوطه ور شدن با بیشتر نرخ بالاانکسار نسبت به هوا، می توانید دیافراگم عددی لنز و در نتیجه وضوح را افزایش دهید.

روزنە عددیلنزها همیشه روی فریم آنها حک می شوند.

وضوح میکروسکوپ به دیافراگم کندانسور نیز بستگی دارد. اگر دیافراگم کندانسور را برابر با دیافراگم لنز در نظر بگیریم، فرمول وضوح R=λ/2NA است که R حد وضوح است. λ - طول موج؛ N.A - دیافراگم عددی. از این فرمول می توان دریافت که هنگام مشاهده در نور مرئی (بخش سبز طیف - λ = 550 نانومتر)، وضوح (حد تفکیک) میکروسکوپ نمی تواند > 0.2 میکرومتر باشد.

غوطه وری (از لاتین immersio - غوطه وری) - مایعی که فضای بین شی مشاهده و یک ماده خاص را پر می کند. لنز غوطه وری(کندانسور و اسلاید شیشه ای). سه نوع مایع غوطه‌وری عمدتاً مورد استفاده قرار می‌گیرند: غوطه‌وری در روغن (MI/Oil)، غوطه‌وری در آب (VI/W) و غوطه‌وری گلیسرول (GI/Glyc)، که دومی عمدتاً در میکروسکوپ فرابنفش استفاده می‌شود.

غوطه وری در مواردی استفاده می شود که نیاز به افزایش وضوح میکروسکوپ باشد یا کاربرد آن نیاز باشد فرآیند تکنولوژیکیمیکروسکوپ وقتی این اتفاق می افتد:

1. افزایش دید با افزایش اختلاف بین ضریب شکست محیط و جسم.

2. افزایش عمق لایه مشاهده شده که به ضریب شکست محیط بستگی دارد.

علاوه بر این، مایع غوطه ور می تواند با از بین بردن تابش خیره کننده از جسم، میزان نور سرگردان را کاهش دهد. این از دست دادن اجتناب ناپذیر نور هنگام ورود به لنز را از بین می برد.

شکست نور - تغییر جهت پرتوهای نور در محیطی با ضریب شکست فضایی در حال تغییر n. معمولاً اصطلاح «R. با." در توصیف انتشار نوری استفاده می شود. تابش در محیط های ناهمگن با تغییر هموار n از نقطه ای به نقطه دیگر (مسیر پرتوهای نور در چنین محیط هایی خطوط منحنی صاف هستند). معمولاً تغییر شدید جهت پرتوها در سطح مشترک بین دو محیط همگن با n متفاوت نامیده می شود. شکست نور در خودپرداز اپتیک، اپتیک عینک به طور سنتی از اصطلاح "انکسار" استفاده می کند. از آنجایی که جو یک محیط ناهمگن است، به دلیل R.s. تغییری در موقعیت ظاهری اجرام آسمانی نسبت به وضعیت واقعی وجود دارد که باید در نجوم مورد توجه قرار گیرد. ر.س. در جو نیز باید هنگام ژئودتیک در نظر گرفته شود. اندازه گیری ها ر.س. عامل سراب است پدیده ر. با. به شما امکان تجسم نوری را می دهد ناهمگنی در محیط های جامد، مایع و گاز

انکسار سنجو من (از لات refractus - شکسته و یونانی. Metreo - I اندازه گیری) روشی برای مطالعه مواد بر اساس تعیین شاخص (ضریب) شکست (شکست) و برخی از عملکردهای آن است. رفرکتومتری (روش شکست سنجی) برای شناسایی ترکیبات شیمیایی، تجزیه و تحلیل کمی و ساختاری و تعیین پارامترهای فیزیکوشیمیایی مواد استفاده می شود.

ضریب شکست n نسبت سرعت نور در محیط مجاور است. برای مایعات و جامدات معمولاً n نسبت به هوا و برای گازها نسبت به خلاء تعریف می شود. مقادیر n به طول موج l نور و دما بستگی دارد که به ترتیب در زیرنویس و بالا نشان داده می شوند. روش های رفرکتومتریبه دو گروه بزرگ: عینی و ذهنی تقسیم می شود. علیرغم مزیت انکارناپذیر روشهای عینی، هر مطالعه عینی، به عنوان یک قاعده، با تعدیل روشهای ذهنی به پایان می رسد.روشهای عینی. دو زیر گروه از روش های انکسار سنجی عینی وجود دارد:

1. عینی در رابطه با بیمار و ذهنی در رابطه با پزشک. یک مثال اسکیاسکپی است که داده های عینی آن را می توان از طریق ارزیابی ذهنی توسط پزشک رفلکس اسکیاسکوپی سوژه به دست آورد. هدف در رابطه با محقق و محقق با استفاده از دستگاه انکسار سنجی اجرا شد.

قطبش نور- فیزیکی مشخصه نوری تشعشع، که ناهمسانگردی عرضی امواج نور را توصیف می کند، یعنی کاهش غیر هم ارزی. جهت ها در صفحه ای عمود بر پرتو نور. موجودات. ارزش برای درک P. از صفحه. نمود خود را در آثار داشت تداخل نورو به ویژه این واقعیت که دو پرتو نور با صفحات قطبی متقابل عمود بر هم مستقیماً تداخلی ندارند. پ.س. طبیعت پیدا کرد توضیح در el.-mag. نظریه نور، که در سالهای 1865-1873 توسط J. C. Maxwell (J. C. Maxwell) توسعه یافت، بعدها - در الکترودینامیک کوانتومی.

اصطلاح پلاریزاسیون امواج توسط مالوس در رابطه با امواج مکانیکی عرضی معرفی شد

برای دریافت نور پلاریزهو برای تشخیص آن، دستگاه های فیزیکی خاصی وجود دارد که در مورد اول پلاریزر و در مورد دوم آنالایزر نامیده می شود. آنها معمولاً ساختار یکسانی دارند.چندین راه برای به دست آوردن و تجزیه و تحلیل نور پلاریزه وجود دارد.

1. پلاریزاسیون با پولاروید. پولارویدها لایه‌های سلولوئیدی هستند که با نازک‌ترین لایه کریستال‌های سولفات نودکوئینین پوشیده شده‌اند. استفاده از پولاروید در حال حاضر رایج ترین روش قطبش نور است.

2. قطبش از طریق بازتاب. اگر یک پرتو طبیعی نور بر روی یک سطح صیقلی سیاه رنگ بیفتد، آنگاه پرتو منعکس شده تا حدی قطبی می شود. به عنوان یک پلاریزه کننده و آنالایزر، می توان از آینه یا شیشه پنجره معمولی نسبتاً صیقلی استفاده کرد که از یک طرف با لاک آسفالت سیاه شده است. درجه قطبش هر چه بیشتر باشد، زاویه تابش صحیح تر حفظ می شود. برای شیشه، زاویه تابش 57 درجه است.

3. قطبش از طریق شکست. پرتو نور نه تنها بر اساس بازتاب، بلکه بر روی آن نیز قطبی می شود

شکست. در این مورد، یک پشته به عنوان قطبی کننده و آنالایزر استفاده می شود.

10-15 صفحه شیشه ای نازک در کنار هم قرار گرفته اند که در زاویه 57 درجه قرار گرفته اند.

منشور نیکلاس (خلاصه نیکولمنشور نیکول دو منشور مثلثی یکسان ساخته شده از اسپار ایسلندی است که با یک لایه نازک از بلسان کانادایی به هم چسبیده اند. منشورها به گونه‌ای ماشین‌کاری می‌شوند که انتهای آن با زاویه 68 درجه نسبت به جهت نور عبوری اریب شده است و طرف‌های چسبانده شده با انتها زاویه راست ایجاد می‌کنند. در این حالت، محور نوری کریستال ( AB) با جهت نور در زاویه 64 درجه قرار دارد.

دیافراگم پلاریزاسیون کامل منشور 29 درجه است. یکی از ویژگی های منشور تغییر جهت پرتو خروجی در طول چرخش منشور است که به دلیل شکست انتهای اریب منشور است. منشور را نمی توان برای پلاریزه کردن اشعه ماوراء بنفش استفاده کرد، زیرا بلسان کانادایی اشعه ماوراء بنفش را جذب می کند. AO) و فوق العاده، با یک صفحه قطبی عمودی ( AE). پس از آن، پرتو معمولی انعکاس داخلی کامل را در صفحه پیوند تجربه می کند و از سطح جانبی خارج می شود. غیر معمول آزادانه از انتهای مخالف منشور خارج می شود.

قانون بروستر - قانون اپتیک که رابطه ضریب شکست را با چنین زاویه ای بیان می کند که در آن نور منعکس شده از سطح مشترک کاملاً در صفحه عمود بر صفحه تابش قطبی می شود و پرتو شکست تا حدی در صفحه قطبی می شود. فرود، و قطبش پرتو شکسته به حداکثر مقدار خود می رسد. به راحتی می توان تشخیص داد که در این حالت پرتوهای بازتابیده و شکسته شده متقابل عمود هستند. زاویه مربوطه نامیده می شود زاویه بروستر.

این پدیده نوری به افتخار فیزیکدان اسکاتلندی دیوید بروستر، که آن را در سال 1815 کشف کرد، نامگذاری شده است.

قانون بروستر : ، جایی که n 12 - ضریب شکست محیط دوم نسبت به اولی، θ برادرزاویه تابش (زاویه بروستر) است.

هنگامی که از یک صفحه در زاویه بروستر منعکس می شود، شدت نور قطبی شده خطی بسیار کم است (حدود 4٪ از شدت پرتو فرودی). بنابراین، به منظور افزایش شدت نور منعکس شده (یا قطبی کردن نور منتقل شده به شیشه در یک صفحه موازی با صفحه تابش)، از چندین صفحه چفت شده استفاده می شود که در یک پا تا شده - پای Stoletov. به راحتی می توان دید در نقاشی چه خبر است. اجازه دهید یک پرتو نور بر بالای پا بیفتد. صفحه اول یک پرتو کاملاً پلاریزه (حدود 4٪ از شدت اصلی) را منعکس می کند، صفحه دوم نیز یک پرتو کاملاً قطبی شده (حدود 3.75٪ از شدت اصلی) را منعکس می کند. در این حالت، با اضافه شدن صفحات، پرتوی که از پایین پا بیرون می‌آید به طور فزاینده‌ای در صفحه‌ای موازی با صفحه برخورد قطبی می‌شود. انکسار کلاین دارد اهمیتبرای ارتباطات رادیویی: بیشتر آنتن های شلاقی امواج قطبی شده را دقیقاً به صورت عمودی ساطع می کنند. بنابراین، اگر موجی به یک رابط (زمین، آب یا یونوسفر) در زاویه بروستر برخورد کند، هیچ موج بازتابی وجود نخواهد داشت، و بر این اساس، کانالی وجود نخواهد داشت.

قانون مالوس - وابستگی شدت نور پلاریزه خطی پس از عبور از پلاریزه کننده به زاویه بین صفحات پلاریزاسیون نور فرودی و پلاریزه کننده، که در آن من 0 - شدت تابش نور به پلاریزه کننده، منشدت نوری است که از قطبش خارج می شود نور با قطبش متفاوت (غیر خطی) را می توان به عنوان مجموع دو جزء قطبی شده خطی نشان داد که قانون مالوس برای هر یک از آنها قابل اجرا است. بر اساس قانون مالوس، شدت نور عبوری در تمام دستگاه های پلاریزه کننده، به عنوان مثال، در فتومترهای پلاریزه و اسپکتروفتومترها محاسبه می شود. تلفات انعکاس بسته به قانون مالوس و در نظر گرفته نشده توسط قانون مالوس علاوه بر این تعیین می شود.

مواد فعال نوری ، محیط های با طبیعی فعالیت نوری. O.-a. V. به 2 نوع تقسیم می شوند. مربوط به 1 از آنها فعال نوری در هر حالت تجمع (قند، کافور، اسید تارتاریک)، به 2 - آنها فقط در فاز کریستالی (کوارتز، سینابار) فعال هستند. در مواد نوع 1، فعالیت نوری به دلیل ساختار نامتقارن مولکول های آنها است، از نوع 2 - با جهت گیری خاص مولکول ها (یون ها) در سلول های واحد کریستال (عدم تقارن میدان نیروهایی که به هم متصل می شوند. ذرات در شبکه کریستالی). کریستال های O. - و. V. همیشه به دو شکل وجود دارد - راست و چپ. در این حالت، شبکه کریستال سمت راست با شبکه کریستال سمت چپ متقارن آینه ای است و نمی توان آن را به صورت فضایی با آن ترکیب کرد (به اصطلاح اشکال انانتیومورفیک، به شکل 2 مراجعه کنید. انانتیومورفیسم). فعالیت نوری فرم های راست و چپ O. - و. V. نوع 2 علائم متفاوتی دارند (و در شرایط خارجی یکسان از نظر قدر مطلق برابر هستند)، بنابراین آنها را پاد پادهای نوری می نامند (گاهی اوقات کریستال های O.-a. ).

چرخش صفحه قطبش نور - با یک پدیدارشناسی مشترک متحد شده است. تجلی گروهی از اثرات شامل چرخش صفحات قطبی شدنموج عرضی در نتیجه برهمکنش با یک محیط ناهمسانگرد. نایب. اثرات مرتبط با V.p.p به خوبی شناخته شده است. نور، اگرچه پدیده های مشابهی در سایر مناطق طیف e.-magn مشاهده می شود. امواج (به ویژه در محدوده مایکروویو)، و همچنین در آکوستیک، فیزیک ذرات بنیادی و غیره. p.p معمولاً به دلیل اختلاف ضریب است. شکست محیط برای دو موج دایره‌ای قطبی شده (در امتداد دایره‌های راست و چپ) (به اصطلاح ناهمسانگردی دایره‌ای) و در حالت کلی توسط یک تانسور محوری رتبه دوم توصیف می‌شود که بردار محوری زاویه را نشان می‌دهد. چرخش صفحه پلاریزاسیون با بردار موج قطبی. در محیطی که فقط ناهمسانگردی دایره ای دارد، یک موج پلاریزه خطی را می توان به دو موج قطبی دایره ای معمولی با دامنه یکسان تجزیه کرد (شکل 2 را ببینید). نوسانات عادی) که اختلاف فاز بین آن آزیموت صفحه پلاریزاسیون موج مجموع را تعیین می کند.در محیط های همگن با ناهمسانگردی دایره ای، زاویه V. p. ناهمسانگردی دایره ای می تواند طبیعی (خود به خودی، ذاتی در محیط در حالت بدون اغتشاش) یا مصنوعی، ناشی از یک عامل خارجی باشد. تأثیر. در حالت دوم، عدم تقارن دایره ای ممکن است به دلیل عدم تقارن عمل اغتشاشگر یا ترکیبی از خواص تقارن محیط و اغتشاش باشد.

زاویه چرخش. پرتو نور می تواند طبیعی و قطبی باشد. در یک پرتو طبیعی نور، نوسانات بردار به طور تصادفی رخ می دهد.

پرتوهای قطبی شده نور به نوبه خود به قطبی خطی تقسیم می شوند، زمانی که نوسانات در یک خط مستقیم عمود بر پرتو اتفاق می افتد. قطبی شده در یک دایره، زمانی که انتهای بردار دایره ای را در صفحه ای عمود بر جهت پرتو توصیف می کند، و به صورت بیضی قطبی شده، که در آن نوسانات در امتداد یک بیضی رخ می دهد.

صفحه ای که در آن نوسانات در یک پرتو پلاریزه صفحه رخ می دهد، صفحه نوسان نامیده می شود.

صفحه ای که از جهت پرتو قطبی شده و عمود بر صفحه نوسان می گذرد، صفحه قطبش نامیده می شود.

امواج نور را می توان با کمک دستگاه های پلاریزه (پلاروئید، صفحه تورمالین، نیکول و غیره) قطبی کرد.

رهنمودها

برای مطالعه اشیایی که با چشم غیرمسلح کوچک هستند و قابل تشخیص نیستند، از ابزارهای نوری ویژه - میکروسکوپ ها استفاده می شود. بسته به هدف، آنها متمایز می شوند: ساده، کاری، پژوهشی و جهانی. با توجه به منبع نور مورد استفاده، میکروسکوپ ها به دو دسته تقسیم می شوند: نور، شب تاب، فرابنفش، الکترون، نوترون، اسکن، تونل زنی. طراحی هر یک از میکروسکوپ های ذکر شده شامل قطعات مکانیکی و نوری است. قسمت مکانیکی برای ایجاد شرایط برای مشاهده - قرار دادن یک جسم، تمرکز تصویر، بخش نوری - برای به دست آوردن یک تصویر بزرگ شده استفاده می شود.

دستگاه میکروسکوپ نوری

میکروسکوپ را میکروسکوپ نوری می نامند زیرا توانایی مطالعه یک جسم را در نور عبوری در یک میدان دید روشن فراهم می کند. در (شکل نمای بیرونی Biomed 2) یک نمای کلی از میکروسکوپ Biomed-2 ارائه شده است.

  1. سه پایه;
  2. پیچ حد؛
  3. پیچ برای بستن نگهدارنده آماده سازی؛
  4. نگهدارنده دارو؛
  5. دستگیره تنظیم درشت؛
  6. دستگیره تنظیم دقیق؛
  7. دستگیره تنظیم ارتفاع کندانسور؛
  8. پیچ مرکزی کندانسور؛
  9. کندانسور؛
  10. چشمی؛
  11. سر تک چشمی؛
  12. هفت تیر برای 4 موقعیت;
  13. لنزها؛
  14. جدول موضوعی؛
  15. روشنگر؛
  16. پایه؛
  1. چشمی؛
  2. سر تک چشمی؛
  3. هفت تیر برای 4 موقعیت;
  4. لنزها؛
  5. جدول موضوعی؛
  6. حلقه تنظیم عنبیه؛
  7. کندانسور؛
  8. روشنگر؛
  9. پایه؛
  10. سه پایه;
  11. اندازه گیری ورنیه;
  12. پیچ حد؛
  13. نگهدارنده دارو؛
  14. دستگیره تنظیم درشت؛
  15. دستگیره تنظیم دقیق؛
  16. دستگیره برای حرکت جدول در امتداد X (از چپ به راست)؛
  17. دستگیره برای حرکت میز در امتداد Y (از خودتان به خودتان)؛
  18. تعویض؛
  19. دستگیره روشنایی

قسمت مکانیکی میکروسکوپ از پایه میکروسکوپ، یک مرحله جسم متحرک و یک دستگاه گردان تشکیل شده است.

فوکوس روی جسم با حرکت دادن صحنه با چرخاندن دستگیره های تنظیم درشت و ظریف انجام می شود.

محدوده فوکوس درشت میکروسکوپ 40 میلی متر است.

کندانسور بر روی یک براکت نصب شده است و بین مرحله شی و لنز کلکتور قرار دارد. حرکت آن با چرخاندن دستگیره تنظیم ارتفاع کندانسور انجام می شود. فرم کلیدر (شکل ???) نشان داده شده است. کندانسور دو عدسی با دیافراگم 1.25 هنگام کار با لنزها با بزرگنمایی 4 تا 100 برابر، زمینه های روی جسم را روشن می کند.

جدول شی روی یک براکت نصب شده است. حرکت صحنه را هماهنگ کنید، احتمالاً با چرخش دسته ها. تثبیت جسم روی میز توسط دارندگان دارو انجام می شود. نگهدارنده ها را می توان نسبت به یکدیگر جابجا کرد.

مختصات جسم و مقدار حرکت بر روی ترازو با ارزش تقسیم 1 میلی متر و ورنیه با مقدار تقسیم 0.1 میلی متر شمارش می شود. دامنه حرکت جسم در جهت طولی 60 میلی متر، در جهت عرضی - 40 میلی متر است. کندانسور

کندانسور

میکروسکوپ مجهز به یونیت اتصال کندانسور با امکان مرکز و فوکوس حرکت می باشد.

میکروسکوپ از یک کندانسور جهانی نصب شده در نگهدارنده به عنوان پایه استفاده می کند. هنگام استفاده از روغن غوطه وری، دیافراگم عددی 1.25 است.

هنگام تنظیم روشنایی، یک تغییر صاف در دیافراگم عددی پرتو پرتوهای روشن کننده آماده سازی با استفاده از دیافراگم دیافراگم انجام می شود.

کندانسور به صورت ثابت در نگهدارنده کندانسور نصب می شود و با یک پیچ قفل محکم می شود.

پیچ های مرکزی کندانسور در هنگام تنظیم روشنایی برای حرکت کندانسور در صفحه ای عمود بر محور نوری میکروسکوپ استفاده می شود در حالی که تصویر ایستگاه میدان را نسبت به لبه های میدان دید در مرکز قرار می دهد.

دستگیره بالا به پایین کندانسور که در سمت چپ براکت نگهدارنده کندانسور قرار دارد، هنگام تنظیم نور برای تمرکز بر روی تصویر دیافراگم میدان استفاده می شود.

فیلترهای نور در یک حلقه چرخشی واقع در پایین کندانسور نصب می شوند.

بخش نوری میکروسکوپ

شامل سیستم های روشنایی و مشاهده است. سیستم روشنایی به طور یکنواخت میدان دید را روشن می کند. سیستم مشاهده برای بزرگنمایی تصویر شی مشاهده شده طراحی شده است.

سیستم روشنایی

زیر جدول موضوع قرار دارد. این شامل یک لنز جمع کننده نصب شده در بدنه است که به سوراخ پایه میکروسکوپ پیچ می شود و یک کارتریج با یک لامپ در آن نصب شده است. کارتریج با لامپ در داخل پایه میکروسکوپ نصب می شود. منبع تغذیه روشنگر میکروسکوپ از شبکه AC از طریق یک کابل برق سه پین ​​که با دوشاخه به برق متصل است، تامین می شود. لامپ روشنایی توسط کلیدی که روی پایه میکروسکوپ قرار دارد روشن می شود.

سیستم رصد

شامل اهداف، اتصال تک چشمی و چشمی است.

لنزها

اجسام مهمترین، با ارزش ترین و شکننده ترین بخش میکروسکوپ هستند. بزرگنمایی، وضوح و کیفیت تصویر به آنها بستگی دارد. آنها سیستمی از لنزهای متمرکز متقابل هستند که در یک قاب فلزی محصور شده اند. در انتهای بالای قاب یک نخ وجود دارد که با آن لنز در سوکت هفت تیر نصب شده است. عدسی جلویی (نزدیک به جسم) در لنز جلو نامیده می شود، تنها لنز در لنز که بزرگنمایی ایجاد می کند. تمام لنزهای دیگر شیئی، لنزهای اصلاحی نامیده می شوند و برای رفع کاستی های تصویر اپتیکال کار می کنند.

هنگامی که پرتوی از پرتوهای نور با طول موج های مختلف از لنزها عبور می کند، رنگ آمیزی رنگین کمانی تصویر رخ می دهد - انحراف رنگی. شکست نابرابر پرتوها در سطح منحنی عدسی منجر به انحراف کروی می شود که به دلیل شکست ناهموار پرتوهای مرکزی و محیطی رخ می دهد. نتیجه یک تصویر نقطه‌دار به شکل یک دایره تار است.

اهداف موجود در کیت میکروسکوپ برای طول نوری لوله 160 میلی متر، ارتفاع 45 میلی متر و ضخامت شیشه پوشش آماده سازی میلی متر طراحی شده است.

اجسام با بزرگنمایی بیش از 10X مجهز به قاب فنری هستند که هنگام فوکوس بر روی سطح آماده سازی از لنزهای آماده سازی و جلوی اهداف در برابر آسیب محافظت می کند.

بر روی بشکه لنز، مطابق با بزرگنمایی، می توان یک حلقه رنگی اعمال کرد و همچنین:

  • روزنە عددی؛
  • طول لوله نوری 160;
  • ضخامت لغزش پوشش 0.17، 0 یا -"؛
  • نوع غوطه وری - روغن روغن (MI) یا آب VI.

اهداف با علامت 0.17 فقط برای بررسی آماده سازی با ضخامت 0.17 میلی متر پوشش پوشش طراحی شده است. اهداف با علامت 0 فقط برای بررسی آماده سازی بدون پوشش طراحی شده اند. اهداف با بزرگنمایی کم (2.5 - 10) و همچنین اهداف غوطه وری را می توان در مطالعه آماده سازی هم با لغزش پوششی و هم بدون لغزش پوشش استفاده کرد. این لنزها با علامت - مشخص شده اند.

چشمی

چشمی میکروسکوپ از دو عدسی تشکیل شده است: چشمی (بالایی) و جمعی (پایین). بین لنزها دیافراگم قرار دارد. دیافراگم پرتوهای جانبی را به تأخیر می اندازد و از نزدیک به محور نوری عبور می کند که کنتراست تصویر را افزایش می دهد. هدف چشمی بزرگنمایی تصویر تولید شده توسط لنز است. چشمی ها دارای بزرگنمایی های اصلی ×5، ×10، 12.5 ×، 16 × و 20 × همانطور که روی قاب نشان داده شده است.

انتخاب چشمی به مجموعه لنزهای مورد استفاده بستگی دارد. هنگام کار با لنزهای آکرومات، آکروستیگمات و آکروفلوورها، توصیه می شود از چشمی هایی با میدان دید خطی بیش از 20 میلی متر استفاده کنید، با لنزهای پلاناکرومات و پلانوکرومات - چشمی با میدان دید خطی 20. 22 و 26.5 میلی متر.

علاوه بر این، میکروسکوپ را می توان به چشمی WF10/22 با مقیاس مجهز کرد. مقدار تقسیم مقیاس 0.1 میلی متر.

ویژگی های میکروسکوپ

بزرگنمایی میکروسکوپ

ویژگی های اصلی یک میکروسکوپ شامل بزرگنمایی و وضوح است. کل بزرگنمایی که یک میکروسکوپ می دهد به عنوان حاصلضرب بزرگنمایی هدف و بزرگنمایی چشمی تعریف می شود. با این حال، افزایش کیفیت تصویر را مشخص نمی کند، می تواند واضح و مبهم باشد. وضوح تصویر حاصل با وضوح میکروسکوپ مشخص می شود، یعنی. کوچکترین اندازه اشیا یا جزئیات آنها که با این دستگاه قابل مشاهده است.

بزرگنمایی کل میکروسکوپ در حین مشاهده بصری با فرمول تعیین می شود: Г = βok × βok، که در آن:

βob - بزرگنمایی لنز (که روی لنز مشخص شده است)؛ βok - بزرگنمایی چشمی (که روی چشمی مشخص شده است).

قطر میدان مشاهده شده در شی، Dob mm، با فرمول تعیین می شود: Add \u003d Dok × βob. داک - قطر میدان دید (که روی چشمی مشخص شده است) میلی متر. مقادیر محاسبه شده بزرگنمایی میکروسکوپ و قطر میدان مشاهده شده روی جسم در جدول 3 آورده شده است.

جدول 3
بزرگنمایی لنزبزرگنمایی میکروسکوپ و میدان مشاهده شده

روی یک شی با چشمی:

5/26* 10/22 15/16*
جیداب، میلی مترجیداب، میلی مترجیداب، میلی متر
4 20 4,0 50 4,5 64 3,75
10 50 2,0 100 1,8 160 1,5
20 100 1,0 200 0,9 320 0,75
40 200 0,5 420 0,45 640 0,38
100 500 0,2 1000 0,18 1600 0,15
  • اختیاری

وضوح میکروسکوپ

قدرت تفکیک میکروسکوپ با حداقل فاصله بین دو نقطه (یا دو باریکترین ضربه) قابل مشاهده به طور جداگانه تعیین می شود و با فرمول محاسبه می شود.

D=λ/(A1+A2)، که در آن d حداقل فاصله (مجاز) بین دو نقطه (خط تیره) است. λ طول موج نور استفاده شده است. A1 و A2 دیافراگم عددی شی (که روی قاب آن مشخص شده است) و کندانسور هستند.

می توانید وضوح را افزایش دهید (یعنی قدر مطلق d را کاهش دهید، زیرا این مقادیر متقابل هستند) به روش های زیر: جسم را با نور با طول موج کوتاهتر λ روشن کنید (مثلاً پرتوهای فرابنفش یا موج کوتاه)، از لنز استفاده کنید. با دیافراگم A1 بزرگتر، یا کندانسور دیافراگم A2 را افزایش دهید.

فاصله کار لنز

میکروسکوپ ها با چهار لنز قابل جابجایی با بزرگنمایی های اصلی 4×، 10×، 40× و 100× که روی قاب فلزی مشخص شده اند عرضه می شوند. بزرگنمایی یک لنز به انحنای لنز جلویی اصلی بستگی دارد: هر چه انحنای بیشتر باشد، فاصله کانونی کمتر و بزرگنمایی بیشتر است. این را باید در حین میکروسکوپ به خاطر بسپارید - هرچه بزرگنمایی لنز بیشتر باشد، فاصله کار آزاد کمتر است و باید بالاتر از سطح آماده سازی پایین بیاید.

غوطه وری

همه لنزها به دو دسته خشک و غوطه ور یا شناور تقسیم می شوند. خشک چنین عدسی است که بین عدسی جلویی آن و آماده سازی مورد نظر هوا است. در این حالت به دلیل اختلاف ضریب شکست شیشه (52/1) و هوا (0/1)، بخشی از پرتوهای نور منحرف شده و وارد چشم ناظر نمی شود. لنزهای سیستم خشک معمولاً فواصل کانونی زیادی دارند و بزرگنمایی کم (10×) یا متوسط ​​(40×) می دهند.

غوطه ور شدن، یا غوطه ور، عدسی هایی هستند که بین عدسی جلویی آن و آماده سازی، یک محیط مایع با ضریب شکست نزدیک به شیشه قرار می گیرد. روغن کاج معمولاً به عنوان یک محیط غوطه وری استفاده می شود. همچنین می توانید از آب، گلیسیرین، روغن های شفاف، مونوبرومونفتالین و ... استفاده کنید. در این حالت، یک محیط همگن (همگن) (شیشه آماده - روغن - شیشه شی) با ضریب شکست یکسان بین عدسی جلویی شیء و شیء نصب می شود. آماده سازی. به همین دلیل، تمام پرتوها، بدون شکست و بدون تغییر جهت، وارد عدسی می شوند و شرایط را برای بهترین روشنایی آماده سازی ایجاد می کنند. مقدار (n) ضریب شکست برای آب 1.33، برای روغن سدر 1.515 و برای مونوبرومونفتالین 1.6 است.

تکنیک میکروسکوپی

میکروسکوپ با کابل برق به برق وصل می شود. با استفاده از یک هفت تیر، عدسی با بزرگنمایی × 10 در مسیر پرتوها تنظیم می شود. توقف خفیف و صدای کلیک فنر هفت تیر نشان می دهد که لنز در امتداد محور نوری نصب شده است. دستگیره فوکوس درشت لنز را به فاصله 0.5 - 1.0 سانتی متر از صحنه پایین می آورد.

قوانین کار با لنزهای خشک

آماده شده روی میز شی قرار می گیرد و با گیره ثابت می شود. با استفاده از یک لنز خشک با بزرگنمایی ×10، چندین میدان دید مشاهده می شود. میز شی با پیچ های جانبی جابجا می شود. محل آماده سازی لازم برای مطالعه در مرکز میدان دید تنظیم شده است. لوله بالا می رود و عدسی با بزرگنمایی 40× با چرخش هفت تیر حرکت می کند، با مشاهده از کنار، لوله با لنز دوباره با یک پیچ ماکرومتریک تقریبا تا زمانی که با آماده سازی تماس پیدا کند پایین می آید. به چشمی نگاه کنید، لوله را به آرامی بالا بیاورید تا خطوط تصویر ظاهر شود. فوکوس دقیق با کمک یک پیچ میکرومتری انجام می شود و آن را در یک جهت یا جهت می چرخانیم، اما نه بیش از یک چرخش کامل. اگر در حین چرخش پیچ میکرومتر مقاومت احساس شود، مسیر آن تا انتها کامل شده است. در این حالت پیچ را یک یا دو دور کامل در جهت مخالف بچرخانید، دوباره با استفاده از پیچ ماکرومتر تصویر را پیدا کنید و با پیچ میکرومتر کار را ادامه دهید.

عادت کردن به باز نگه داشتن هر دو چشم در حین میکروسکوپ و استفاده متناوب از آنها مفید است، زیرا این کار باعث کاهش بینایی می شود.

هنگام تغییر اهداف، نباید فراموش کرد که وضوح میکروسکوپ به نسبت دیافراگم شی و کندانسور بستگی دارد. دیافراگم عددی شی با بزرگنمایی ×40 0.65 است، کندانسور غیر غوطه ور 0.95 است. عملاً می توان آنها را با روش زیر مطابقت داد: پس از متمرکز کردن آماده سازی با هدف، باید چشمی را بیرون آورد و با نگاه کردن به لوله، دیافراگم عنبیه کندانسور را بپوشاند تا لبه های آن در لبه نمایان شود. از لنز پشتی شیئی که به طور یکنواخت روشن شده است. در این مرحله، دیافراگم عددی کندانسور و شی تقریباً برابر خواهد بود.

قوانین کار با لنز غوطه وری

یک قطره کوچک روغن غوطه وری روی آماده سازی (ترجیحاً ثابت و رنگی) ریخته می شود. هفت تیر چرخانده شده و یک هدف غوطه وری با بزرگنمایی 100× در امتداد محور نوری مرکزی نصب شده است. کندانسور تا توقف بلند می شود. دیافراگم عنبیه کندانسور کاملاً باز است. با نگاه از کنار، لوله با یک پیچ ماکرومتریک پایین می آید تا زمانی که لنز در روغن غوطه ور شود، تقریباً تا زمانی که لنز با لام نمونه تماس پیدا کند. این کار باید بسیار با احتیاط انجام شود تا لنز جلویی جابجا نشود و آسیب نبیند. آنها به چشمی نگاه می کنند، پیچ ماکرومتریک را به آرامی به سمت خود می چرخانند و بدون اینکه لنز را از روی روغن بلند کنند، لوله را بالا می آورند تا خطوط جسم ظاهر شود. لازم به یادآوری است که فاصله کار آزاد در لنز غوطه وری 0.1 - 0.15 میلی متر است. سپس فوکوس دقیق با پیچ ماکرومتریک انجام می شود. چندین میدان دید را در آماده سازی در نظر بگیرید، میز را با پیچ های جانبی حرکت دهید. در پایان کار با لنز غوطه ور، لوله بلند می شود، آماده سازی برداشته می شود و عدسی جلوی شی ابتدا با یک پارچه نخی نرم خشک و سپس با همان پارچه، اما کمی با بنزین خالص مرطوب می شود. روغن را روی سطح لنز نگذارید، زیرا به نشستن گرد و غبار کمک می کند و به مرور زمان می تواند به اپتیک میکروسکوپ آسیب برساند. این دارو ابتدا با یک تکه کاغذ صافی از روغن خارج می شود، سپس شیشه با بنزین یا زایلن تصفیه می شود.