Медицина

Хламидиоз. Методы определения/диагностики

|                                                           |
|ХЛАМИДИОЗ - СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К ДИАГНОСТИКЕ И ЛЕЧЕНИЮ    |
|Цитоскопические методы обнаружения хламидий                |
|При цитоскопическом методе одновременно с поиском          |
|цитоплазматических клеток-включений Провачека учитывается  |
|количество лейкоцитов как показателя воспаления, а также   |
|дополнительная информация о наличии сопутствующей          |
|бактериальной микрофлоры, дрожжеподобных грибов, трихомонад|
|и т.п.                                                     |
|Показания: Острая фаза заболевания.                        |
|Материалом для исследования служат соскобы из уретры у     |
|мужчин и уретры и /или цервикального канала у женщин.      |
|Материал берут специальными щеточками или ложечками        |
|Фолькмана. Выделения из цервикального канала удаляются     |
|ватным тампоном. Щеточка вводится в канал на 1-2 см,       |
|вращается 15 секунд . Соскобный материал распределяется на |
|предметном стекле, высушивается на воздухе и фиксируется в |
|метаноле или холодном ацетоне. Наиболее популярна окраска  |
|по Романовскому-Гимзе. После окраски препараты             |
|просматриваются в световом микроскопе, используя           |
|иммерсионный объектив (х90). При этом цитоплазма клеток    |
|окрашивается в голубой цвет, ядра в фиолетово-синий,       |
|цитоплазматические включения определяются в виде           |
|темно-синих или розовых микроколоний на фоне голубой       |
|цитоплазмы. На стадии элементарных включения хламидий      |
|окрашиваются в розовый цвет, на стадии элементарных телец  |
|-в синий.                                                  |
|Цитоскопический метод широко доступен, но эффективен лишь  |
|при острых формах инфекции, значительно менее эффективен и |
|информативен при хронических формах заболевания При        |
|урогенитальном хламидиозе частота обнаружения телец        |
|Провачека в соскобах уретры и цервикального канала не      |
|превышает 10-12 %. Наличие этих телец подтверждает диагноз |
|хламидиоза, однако их отсутствие не исключает наличие      |
|инфекции.                                                  |
|                                                           |
|                                                           |
|Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ)                           |
|Этот метод предусматривает прямое выявление антигенов      |
|хламидий. При люминесцентной микроскопии включения хламидий|
|определяются в виде зеленой или желто-зеленой флюоресценции|
|включений на коричнево-оранжевом фоне цитоплазмы клеток    |
|Включения могут иметь зернистую гомогенную или смешанную   |
|структуру.                                                 |
|Показаниями для диагностики хламидийной инфекции этим      |
|методом являются:                                          |
|1.Острая фаза заболевания.                                 |
|2.Хроническая фаза заболевания                             |
|3 Установление этиологии хронического инфекционного        |
|процесса урогенитального тракта                            |
|4. Беременность с отягощенным акушерским анамнезом         |
|5. Бесплодие неясного генеза.                              |
|Диагностическая информативность ПИФ связана с тем, что с ее|
|помощью выявляются не только корпускулярные, но и          |
|растворимые антигены хламидий Этот метод не зависит от     |
|возможного изменения тинкториальных свойств микроорганизма |
|в процессе заболевания и лечения. ПИФ-метод является       |
|важнейшим скриннинговым методом диагностики урогенитального|
|хламидиоза. Его чувствительность и специфичность при       |
|использовании моноклональных антител составляет            |
|соответственно 65-90% и 85-90%. При оценке результатов     |
|следует учитывать, что только показатели внутриклеточной   |
|флюоресценции могут оцениваться в качестве положительного  |
|результата этого теста при использовании поликлональных    |
|антихламидийных антител, при использовании моноклональных -|
|результат считают при наличии 10 ЭТ в поле зрения.         |
|Соскобные препараты готовят также, как и для               |
|цитоскопических исследований.                              |
|Выпускают диагностические наборы, содержащие моноклональные|
|антитела для ПИФ, следующие фирмы: Syva, Drfco, Kallastad, |
|Bartrels, Boots celltech, California Integrated            |
|Diagnostics, Orion Diagnostica. Реагенты фирм Syva, Difco, |
|Kallastad представляют собой меченные ФИТЦ моноклональные  |
|антитела к основному белку наружной мембраны хламидий, а   |
|реагенты других фирм - моноклональные антитела к           |
|родоспецифическому хламидийному липолисахариду (ЛПС). В    |
|России ЗАО “НИАРМЕДИК плюс” при НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН|
|выпускает моноклональные антитела к ЛПС хламидий, которые  |
|успешно конкурируют с продукцией иностранных фирм по       |
|качеству продукции. Это набор “Хламоноскрин” для           |
|определения моноклональных антител к родоспецифическому    |
|липополисахаридному антигену и набор “Хламоноскрин-2” для  |
|определения моноклональных антител к видоспецифическому    |
|белковому антигену хламидий трахоматис. Наборы имеют ФС    |
|42-359598 и регистрационное удостоверение Минздрава России |
|93/ 270/ 9 .                                               |
|Моноклональные антитела отличаются друг от друга по        |
|вызываемой яркости свечения, постоянству выявляемых форм ЭТ|
|и степени специфичности. Для диагностики хламидий этим     |
|методом необходим люминесцентный микроскоп.                |
|В целом, метод ПИФ отвечает критериям высокой              |
|чувствительности и специфичности, но требует исполнения    |
|опытным, компетентным лабораторным работником.             |
|Высококвалифицированная экспертная оценка методом ПИФ редко|
|бывает доступной, поэтому средняя чувствительность его     |
|снижается. Метод недостаточно чувствителен и для           |
|стабильного определения малых количеств ЭТ. К тому же      |
|невозможно проверить и отрицательные результаты, и,        |
|следовательно, обнаружить среди них ложноотрицательные, что|
|приводит к снижению чувствительности.                      |
|                                                           |
|                                                           |
|Иммуноморфологические методы                               |
|Эти методы основаны на обнаружении антигенных субстанций   |
|хламидий в эпителии и других тканях путем обработки        |
|препаратов специфическими антителами. Антитела             |
|диагностической антихламидийной сыворотки соединены с      |
|какой-либо меткой - люминесцирующей (ФИТЦ-антитела) или    |
|ферментной (энзим-меченые антитела).                       |
|                                                           |
|                                                           |
|Непрямой метод иммунофлюресценциии                         |
|Непрямой метод иммунофлюресценции применяют в тех случаях, |
|когда нет в наличии ФИТЦ-конъюгата антихламидийных антител.|
|В этих случаях приготовленный тем же методом, что и для ПИФ|
|препарат из клинических проб обрабатывают вначале          |
|антихламидийными антителами, полученными путем иммунизации |
|хламидиями овец, кроликов, мышей или других животных, а    |
|затем второй сывороткой, специфичной для вида животного,   |
|которое было иммунизировано хламидиями. Антитела второй    |
|сыворотки конъюгированы с ФИТЦ. Показания к применению и   |
|специфичность данного метода совпадают с ПИФ.              |
|                                                           |
|                                                           |
|Диагностика хламидий на культуре клеток МсСоу              |
|Одним из лучших, но в то же время наиболее трудоемким      |
|является метод диагностики хламидий путем изоляции         |
|возбудителя на культуре клеток, обработанных различными    |
|антиметаболитами (“золотой стандарт”) Для этой цели обычно |
|используют чувствительную культуру клеток, обработанную    |
|циклогексимидом. Чувствительность культурального метода по |
|сравнению с ПЦР составляет 70-80%, но в то же время он     |
|превосходит молекулярно-биологические методы диагностики по|
|специфичности. В литературе описаны случаи выявления       |
|хламидий трахоматис методом ПЦР при отрицательных          |
|результатах культурального теста и наоборот.               |
|Показаниями для диагностики хламидийной инфекции этим      |
|методом являются:                                          |
|1 Беременность с отягощенным акушерским анамнезом.         |
|2. Оценка эффективности проведенного антибактериального    |
|лечения.                                                   |
|3. Выявление чувствительности и резистентности к           |
|антибактериальным                                          |
|препаратам.                                                |
|4. Выявление хламидий у ВИЧ-инфицированных или лиц со      |
|вторичными иммунодефицитными состояниями (онкологические   |
|больные после проведенных курсов лучевой и химиотерапии,   |
|трансплантации костного мозга; лица, получающие            |
|иммунодепрессанты; больные вирусным гепатитом и            |
|туберкулезом).                                             |
|5. Бесплодие неясного генеза.                              |
|6. Установление этиологии хронического инфекционного       |
|процесса урогенитального тракта.                           |
|Культуральный посев является референс-методом при оценке   |
|эффективности антибактериального лечения. При исследовании |
|биопроб методом ПЦР после курса химиотерапии в некоторых   |
|случаях можно получить “ложноположительные с клинической   |
|точки зрения” результаты. Это связано с тем, что невозможно|
|однозначно оценить жизнеспособность и патогенность         |
|микробной клетки на основании выявления фрагмента ее       |
|генома, используя только данные молекулярно-биологических  |
|методов. В этом случае при исследовании клинического       |
|материала с помощью культурального посева микробные клетки,|
|потерявшие эти важные с клинической точки зрения свойства, |
|не дадут роста в клеточной культуре.                       |
|Для транспортировки и хранения клинического материала      |
|используют специальную питательную среду (транспортная     |
|среда). Она разливается в пенициллиновые флаконы по 1 мл и |
|хранится при температуре + 4 ° С (в общей камере бытового  |
|холодильника) в течение 2-х месяцев. Состав транспортной   |
|среды: среда MEM с добавлением 10% сыворотки крупного      |
|рогатого скота и антибиотика гентамицина концентрации 50   |
|мкг/мл .                                                   |
|Клинический материал после перенесения в транспортную среду|
|хранится в общей камере холодильника при температуре + 4 ° |
|С и, в течение двух суток должен быть доставлен в          |
|лабораторию.                                               |
|Процедура посева                                           |
|1. Обработка однодневной клеточной культуры МсСоу 1%       |
|раствором ДЕАЕ декстраном в течение 30 минут.              |
|2. Заражение обработанных клеток материалом, полученным от |
|больных.                                                   |
|3. Центрифугирование зараженных клеток при 2500 g в течение|
|45 минут.                                                  |
|4. Отмывка клеток питательной средой.                      |
|5. Добавление к клеткам ростовой среды, содержащей         |
|циклогексимид.                                             |
|6. Инкубирование клеток в течение двух суток при +36 ° С.  |
|7. Обнаружение хламидий в клетках методом прямой           |
|иммунофлюоресценции или ПЦР.                               |
|Реальный срок получения результатов этим методом - семь    |
|дней.                                                      |
|                                                           |
|В настоящее время в литературе растет число сообщений о    |
|случаях резистентности хламидий к антибактериальным        |
|препаратам (эритромицину, тетрациклину, доксициклину,      |
|фторхинолонам). Ценность культурального метода состоит в   |
|том, что он является пока единственным методом, позволяющим|
|выбрать антибактериальный препарат для лечения хламидийной |
|инфекции и оценить эффективность антибактериальной терапии.|
|                                                           |
|Схема метода выявления устойчивости хламидий трахоматис к  |
|антибактериальным препаратам                               |
|-Хламидийным изолятом, выделенным от больного при посеве,  |
|заражают чувствительные клетки.                            |
|-К зараженным клеткам добавляют ростовую среду, содержащую |
|антибиотик.                                                |
|-Зараженные клетки инкубируют 5 дней при температуре + 36 °|
|С.                                                         |
|-Чувствительность хламидий к антибиотику определяется по   |
|подавлению инфекции в зараженных клетках. Процедура        |
|длительная, занимает по времени две недели.                |
|                                                           |
|                                                           |
|Диагностика Chlamydia trachomatis методом полимеразной     |
|цепной реакции                                             |
|Дороговизна, длительность и трудоемкость                   |
|микробиологического выделения хламидий в культуре          |
|существенно затрудняет использование этой процедуры в      |
|рутинной лабораторной диагностике. В литературе накоплен   |
|обширный клинико-лабораторный опыт по использованию метода |
|ПЦР для выявления хламидий трахоматис. Особое внимание при |
|его использовании следует уделять, без сомнения, вопросам  |
|правильной интерпретации получаемых результатов.           |
|Экстремально высокие показатели чувствительности и         |
|специфичности ПЦР делают эту методику во многом            |
|революционной в лабораторной диагностике. Основными        |
|мишенями при выявлении хламидий трахоматис являются        |
|нуклеотидная последовательность видоспецифической          |
|криптической плазмиды, последовательность главного белка   |
|внутренней мембраны, рибосомальные гены.                   |
|Данная реакция представляет собой многократно повторяющиеся|
|циклы синтеза (амплификацию) специфической области         |
|ДНК-мишени в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы,   |
|дезоксинуклеотидтрифосфатов, соответствующего солевого     |
|буфера и олигонуклеотидных затравок-праймеров, определяющих|
|границы амплифицируемого участка. Каждый цикл состоит из   |
|трех стадий с различными температурными режимами. На первой|
|стадии при 94 ° С происходит разделение цепей ДНК, затем   |
|при 56-58 ° С - присоединение (отжиг) праймеров к          |
|комплементарным последовательностям на ДНК-мишени, и при   |
|температуре 72 ° С протекает синтез новых цепей ДНК путем  |
|достраивания цепей праймеров в направлении 5’ –3’ . В      |
|каждом цикле происходит удвоение числа копий               |
|амплифицируемого участка, что позволяет за 25-40 циклов    |
|наработать фрагмент ДНК, ограниченный парой выбранных      |
|праймеров, в количестве, достаточном для ее детекции с     |
|помощью электрофореза или альтернативными ему технологиями |
|По сравнению с широко применяющимися иммунологическими     |
|тестами ПЦР-диагностика обладает рядом преимуществ:        |
|-высокой и регулируемой специфичностью, обусловленной лишь |
|нуклеотидной последовательностью, применяемой в данной     |
|диагностической системе;                                   |
|-высокой чувствительностью, позволяющей диагносцировать не |
|только острые, но и латентные инфекции (возможно выявление |
|даже единичных бактерий или вирусов);                      |
|-химическое сходство всех нуклеиновых кислот позволяет     |
|разрабатывать универсальные процедуры для выявления        |
|различных инфекционных агентов,                            |
|-возможностью идентификации возбудителя в течении 4,5-5    |
|часов.                                                     |
|                                                           |
|Доставка биоматериала в ПЦР-лабораторию производится в     |
|холодовом термоконтейнере или термосе со льдом. Важной     |
|отличительной особенностью ПЦР-диагностики является        |
|относительно низкая стоимость оборудования для проведения  |
|анализа, сочетающаяся с универсальностью метода, что       |
|позволяет выявлять весь спектр клинически актуальных       |
|инфекционных агентов.                                      |
|                                                           |
|ПЦР-лаборатория должна быть разделена на зоны (комнаты).   |
|Следует иметь не менее двух комнат                         |
|-пре-ПЦР-помещение, где проводится обработка клинических   |
|образцов, выделение ДНК, приготовление реакционной смеси   |
|для ПЦР и постановка ПЦР (при наличии условий два последних|
|этапа рекомендуется также проводить в дополнительном       |
|отдельном помещении), в этих помещениях запрещается        |
|проводить все другие виды работ с инфекционными агентами   |
|(микробиологический анализ, ИФА, другие диагностические    |
|тесты), ПЦР-диагностика которых проводится в данной        |
|лаборатории.                                               |
|-пост-ПЦР-помещение, где проводится детекция продуктов     |
|амплификации, в ПЦР-помещении допускается использовать     |
|другие методы детекции инфекций, диагностика которых       |
|проводится в данной лаборатории. Комнату детекции продуктов|
|амплификации (пост-ПЦР-помещение) следует располагать как  |
|можно дальше от пре-ПЦР-помещений. Следует исключить       |
|движение воздушного потока из пост-ПЦР-помещения в         |
|пре-ПЦР-помещение.                                         |
|В комнате приготовления реакционной смеси и в комнате      |
|обработки клинических образцов должны быть установлены     |
|ультрафиолетовые лампы, рабочие поверхности в лаборатории  |
|должны обрабатываться дезинфицирующими растворами .        |
|Показания для диагностики С. trachomatis методом ПЦР       |
|1. Острая фаза заболевания                                 |
|2. Хроническая фаза заболевания                            |
|3. Установление этиологии хронического инфекционного       |
|процесса урогенитального тракта.                           |
|4. Беременность с отягощенным акушерским анамнезом. 5      |
|Бесплодие неясного генеза.                                 |
|6. Контроль эффективности проведенного антибактериального  |
|лечения.                                                   |
|В случае выявления фрагмента ДНК хламидии трахоматис после |
|курса химиотерапии следует провести культуральную          |
|диагностику для исключения “ложноположительного с          |
|клинической точки зрения результата”. Если проведение      |
|культуральной диагностики невозможно, то необходимо через  |
|5-6 недель (полное обновление эпителиального покрова       |
|мочеполовых путей) провести повторное исследование методом |
|ПЦР.                                                       |
|7. Выявление хламидии у ВИЧ-инфицированных лиц, больных    |
|туберкулезом, вирусным гепатитом и со вторичными           |
|иммунодефицитными состояними (онкологические больные после |
|курсов химио- и лучевой терапии, трансплантации костного   |
|мозга, получающие иммуносупрессивную терапию).             |
|В 1991 году компания Хоффман-ла Рош ЛТД получила от        |
|компании Cetus права и патенты на использование ПЦР. В этом|
|же году была создан Roche Molecular Systems, занимающийся  |
|исключительно вопросами развития и совершенствования ПЦР. В|
|1992 году были внедрены первые стандартизованные           |
|тест-системы для клинической ПЦР-диагностики AMPLICOR      |
|Chlamydia trachomatis, а в 1993 году начато производство   |
|этих тест систем. Многочисленные проведенные исследования  |
|показали высокую чувствительность и специфичность данного  |
|набора. Это позволило получить данной тест-системе         |
|сертификат Food and Drug Administration (FDA) в 1993 году. |
|В 1995 году появился новый набор AMPLICOR Chlamydia        |
|trachomatis/Neisseria gonorrhoeae для одновременной их     |
|детекции в одной пробирке. В тесте использованы            |
|биотинилированные праймеры (СР24/СР27) из криптической     |
|плазмиды С. trachomatis. Чувствительность теста составляет |
|10 копий/мл, специфичность 99,6%. Тест-система включает:   |
|набор для сбора и транспортировки образцов, набор для      |
|выделения ДНК из цервикальных, уретральных образцов и мочи,|
|набор для амплификации и детекции. Все наборы              |
|стандартизованы, полностью готовы к использованию, имеют   |
|внутренний контроль, систему защиты от контаминации.       |
|Научно-производственной фирмой "Литех" при НИИ             |
|физико-химической медицины МЗ РФ выпускается набор         |
|реагентов "Полимик" в виде трех отдельных наборов для      |
|определения соответственно Chlamydia trachomatis,          |
|Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealiticum. Каждый набор   |
|“Полимик” комплектуется отдельным набором для выделения ДНК|
|из биопроб. Инструкция по применению набора реагентов      |
|рекомендована к утверждению экспертной комиссией Комитета  |
|по новой медицинской технике МЗ РФ (протокол No 3 от       |
|18.03.96 г.) и утверждена Министерством здравоохранения РФ |
|17.05.96 г. (ТУ 9398-405-17253567-96).                     |
|В состав реакционной смеси набора “Полимик” входит         |
|внутренний контроль (рекомбинантная плазмида, содержащая   |
|фрагмент-вставку размером 308 н.п.). Этот компонент        |
|позволяет контролировать процесс прохождения реакции       |
|амплификации, а также тестировать наличие в пробах веществ,|
|ингибирующих ПЦР. Полоса, соответствующая внутреннему      |
|контролю, должна проявляться как в положительном и в       |
|отрицательном контролях, так и во всех тестируемых пробах. |
|При выделении ДНК из биопробы (“Набор для выделения ДНК”)  |
|используется метод экстракции ДНК из клеток хламидий с     |
|помощью гуанидина тиоцианата и связывания высвобождающихся |
|нуклеиновых кислот с частицами крупнопористого стекла. Это |
|позволяет оптимизировать условия выделения и подготовки    |
|проб для амплификации, а также уменьшить количество        |
|манипуляций с образцом. При этом все манипуляции проводятся|
|в одной пробирке. Выход хромосомной ДНК составляет 70-80%  |
|по результатам определения числа колониеобразующих единиц  |
|клеток Acholeplasma laidlawii (штамм микоплазм, взятый в   |
|качестве стандарта) как в случае чистой культуры, так и при|
|добавлении этих клеток к клиническому материалу, не        |
|содержащему определяемых инфекционных агентов.             |
|После завершения ПЦР продукты амплификации фракционируют   |
|методом электрофореза в 1,5% агарозном геле.               |
|Анализ результатов диагностики                             |
|1. В положительном контрольном образце для хламидий        |
|выявляется полоса размером 501 н.п.                        |
|2. В отрицательном контрольном образце полоса,             |
|соответствующая фрагментам генома хламидий, должна         |
|отсутствовать. Появление полосы в отрицательном контроле   |
|свидетельствует о контаминации компонентов набора.         |
|3. В анализируемой пробе отсутствие полосы строго на уровне|
|соответствующего контроля свидетельствует об отсутствии    |
|возбудителя в пробе, наличие полосы, соответствующей по    |
|электрофоретической подвижности положительному контролю,   |
|свидетельствует о наличии хламидий в клинической пробе.    |
|4. Во всех образцах выявляется полоса оранжево-красного    |
|цвета, соответствующая внутреннему контролю размером 308   |
|н.п. Полученные результаты можно документировать           |
|фотографированием гелей с использованием оранжевого или    |
|интерференционного (594 нм) светофильтра. При использовании|
|видеосистемы "Gel-doc" возможно документирование           |
|результатов электрофореза в виде компьютерного файла,      |
|доступного любым приложениям “Windows”.                    |
|Набор “Полимик” следует хранить при температуре - 18-20 ° С|
|в течение всего срока годности (6 месяцев). Допускается,   |
|хранение и транспортировка набора при температуре не выше 0|
|° градусов не более одних суток.                           |
|По состоянию на третий квартал 1999 г. Минздравом России   |
|помимо набора “Полимик” разрешены следующие диагностические|
|наборы для обнаружения хламидий трахоматис методом ПЦР в   |
|качестве изделий медицинского назначения:                  |
|набор реагентов амплификационный для определения ДНК       |
|хламидий (Хламидия-Ампли-тест) ТУ 9398-402-18137053-96     |
|производства АО “ВНЦМДЛ”, Москва;                          |
|набор реактивов для выявления нуклеотидных                 |
|последовательностей хламидия трахоматис методом ПЦР (Хлам  |
|Ам) ТУ “9398-403-29032954-96 производства ЗАО “Внедрение   |
|систем в медицину”. Москва,                                |
|набор реагентов для выявления ДНК хламидий трахоматис      |
|методом ПЦР (Хлам-Ген) ТУ 9398-412-46482062-97 производства|
|НПФ “ДНК-технология”, Москва.                              |
|                                                           |
|                                                                  |
|Достоинства и недостатки различных методов обнаружения Chlamydia  |
|trachomatis                                                       |
|(Taylor-Robinson О., Thomas B.J ,1991, с дополнениями Говорун В.М,|
|Бочкарев Е.Г., Парфенова Т.М., 1999)                              |
|                                                                  |
|Характеристика/ Метод                                             |
|ПИФ                                                               |
|Культуральный посев                                               |
|ИФА-методы                                                        |
|ПЦР                                                               |
|                                                                  |
|Исследуемый материал                                              |
|Любой                                                             |
|Большинство                                                       |
|Ограничения из-за неспецифичности реакций                         |
|Любой                                                             |
|                                                                  |
|Значение правильно взятых проб                                    |
|Решающее                                                          |
|Решающее                                                          |
|Решающее                                                          |
|Решающее                                                          |
|                                                                  |
|Условия транспортировки проб                                      |
|Если препарат фиксирован -условия не важны                        |
|Быстрая доставка или хранение при низкой температуре              |
|Не имеет значения, если проба взята в буфер                       |
|Быстрая доставка или хранение при низкой to менее важно, чем для  |
|культуры клеток                                                   |
|                                                                  |
|Условия хранения                                                  |
|На короткое время при +4°С длительно при -20 °С                   |
|+4°С - сутки-двое. Длит хранение в жидком азоте                   |
|3 -5 дней при +4°С Замораживание снижает чувствительность         |
|На короткое время + 4°С, две недели - 20°С Длительное время - в   |
|жидком азоте                                                      |
|                                                                  |
|Проверка адекватности взятия материала                            |
|Мазки оценивают во время тестирования                             |
|Не практикуется                                                   |
|Не практикуется                                                   |
|Определяется, присутствует ли ДНК.                                |
|                                                                  |
|Потребность в специальном оборудовании                            |
|Люминесцентный микроскоп                                          |
|Центрифуга                                                        |
|Комплект для ИФА                                                  |
|Амплификатор и оборудование для электрофореза                     |
|                                                                  |
|Обработка проб                                                    |
|Простая                                                           |
|Трудоемкая                                                        |
|Становится проще для новых тестов                                 |
|Требует строгой предосторожности, чтобы не контаминировать ДНК    |
|                                                                  |
|Чтение результатов                                                |
|Субъективное и утомительное                                       |
|Субъективное умеренно утомительное                                |
|Объективное, Простое                                              |
|Объективное, простое                                              |
|                                                                  |
|Время выполнения                                                  |
|30 минут                                                          |
|12-72 часа                                                        |
|3 часа                                                            |
|4,5-5 часов                                                       |
|                                                                  |
|Способы проверки результатов                                      |
|Повторный просмотр                                                |
|Повторный просмотр                                                |
|Повторение теста                                                  |
|Повторная проба или переваривание эндоуклеазой                    |
|                                                                  |
|Результат зависит от следующих причин:                            |
|Опыта микроскописта                                               |
|Чувствительности клеточной культуры                               |
|Присущей мощности теста                                           |
|Требует хорошего контроля и отсуствия контаминации                |
|                                                                  |
|Способность к поддержанию штамма                                  |
|Нет                                                               |
|Да                                                                |
|Нет                                                               |
|Нет                                                               |
|                                                                  |
|Использование как контроля эффективности лечения                  |
|Ограничено                                                        |
|Рекомендуется                                                     |
|Ограничено                                                        |
|Рекомендуется с ограничениями                                     |
|                                                                  |
|                                                                  |
|                                                                  |





смотреть на рефераты похожие на "Хламидиоз. Методы определения/диагностики "